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使用試劑盒,甚至可以從固定了長達17年的組織中成功提取出DNA

儘管已經有些發表的文章比較了不同的從石蠟塊中提取DNA的方法(見Sepp et al。1994),然而。

根據我們的經驗,最好是使用市售試劑盒從石蠟包埋組織提取DNA。常規脫蠟後用二甲苯或商業產品,例如QIAamp DNA Mini Kit (QIAGEN)、BiOstic FFPE Tissue DNA Isolation Kit (MO BIO Laboratories),或QuickExtract FFPE DNA Extraction Kit(Epicentre Biotechnologis/llumina),DNA 可以被提取出來。

使用試劑盒,甚至可以從固定了長達17年的組織中成功提取出DNA。已經有報道其他研究者從更老的石蠟塊中分離DNA。但是,提取的DNA往往是高度退化,尤其是當組織在包埋前被非緩衝福爾馬林固定了很長一-段時間(如12~ 24h)。

在一般情況下,從石蠟包埋的甲醛固定組織中提取的DNA只能用於PCR模板,而且擴增片段大小少於120鹼基。

雖然得率低於微克級別,但DNA足以用於基於陣列的分析,例如,llumina 的基於SNP的雜合性丟失分析( Barker et al。2004; Lips et al。 2005; Oosting et al。 2007),或者用於分析腫瘤細胞中DNA啟動子突變的Sequenom‘s OncoCarta系統(McConnaill et al。 2009)。

聚乙二醇(PEG)是一個簡單的重複單元H(OCH2CH2),0H的直鏈聚合物。